Ascanio Colonna (Marino, 27 aprile 1560 – Palestrina, 17 maggio 1608) è stato un cardinale e vescovo cattolico italiano.
Ascanio, nato da Marcantonio Colonna, duca di Paliano e di Tagliacozzo e da Felicia Orsini era cugino di Antonio Caetani (1566-1624) anch'egli futuro cardinale.
Studiò latino e greco e frequentò le università di Salamanca e di Alcalá, ottenendo presto il titolo di maestro in filosofia e teologia e la laurea in utroque iure.
Creato cardinale nel concistoro del 16 novembre 1586 da papa Sisto V, nel 25 febbraio 1587 ricevette la diaconia dei Santi Vito e Modesto.
Il 5 dicembre 1588 optò per la diaconia di San Nicola in Carcere a Roma, partecipando ai conclavi del 1590, del 1591 e 1592.
Nel 1592 divenne Protobibliotecario della Biblioteca Vaticana e nel Palazzo di famiglia a Roma formò una biblioteca di più di 7.000 volumi che nel 1740 confluirà nella Biblioteca Vaticana.
Nel 1600 fu inviato in Spagna e nel 1602 a Saragozza venne nominato Viceré d'Aragona da Filippo III. Mantenne questa carica fino al 1605. In questo soggiorno in Spagna lo accompagnò come segretario, per breve tempo, il letterato Alessandro Tassoni.
Morì a Palestrina e fu sepolto nella Cappella di famiglia nella Basilica del Laterano a Roma.
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